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वीडियो: आप क्लोन कैसे चुनते हैं?
2024 लेखक: Stanley Ellington | [email protected]. अंतिम बार संशोधित: 2023-12-16 00:17
कब चुनने ए क्लोन , सुनिश्चित करें कि जड़ें मजबूत, सफेद और विकसित माध्यम से उत्सुकता से उभरी हुई हैं। यदि जड़ें भूरी और सिकुड़ी हुई हैं, या अन्यथा निष्क्रिय दिखाई देती हैं, तो इसे वापस रख दें और बेहतर की तलाश करें।
इसके अलावा, आप एकल कोशिका का क्लोन कैसे बनाते हैं?
- मध्यम के 200 µ एल युक्त 96-वेल प्लेट के पहले कुएं (A1) में ~ 16,000 कोशिकाओं को डालने के लिए कक्षों की गणना करें ।
- A1 युक्त कोशिकाओं से 100 µ l निकालें और B1 के साथ मिलाएं, 100 µ l को हटाने और C1 के साथ मिलाने से पहले अच्छी तरह से मिश्रण करने के लिए 3x ऊपर और नीचे पाइपिंग करें ।
इसके अलावा, आप एक स्तनधारी कोशिका कॉलोनी कैसे चुनते हैं? सूक्ष्मदर्शी के नीचे प्लेट रखें ताकि अविभाजित स्वस्थ का चयन किया जा सके कालोनियों . कॉलोनियां चुनें एक P-20 पिपेट का उपयोग करके 10ul पर सेट करें। सावधानी से चुनना ए कालोनी बिना तोड़े कालोनी एकल में प्रकोष्ठों , और इसे ट्रिप्सिन के साथ 96-वेल प्लेट में स्थानांतरित करें। पिपेट ऊपर और नीचे एक दो बार तितर-बितर करने के लिए कालोनी.
इसके अनुरूप, आप क्लोन सिलेंडर का उपयोग कैसे करते हैं?
का उपयोग करते हुए बाँझ मध्यम संदंश, उठाओ a क्लोनिंग सिलेंडर . के सपाट तल को धीरे से दबाएं सिलेंडर चिकनी सिलिकॉन ग्रीस में डालें और अचानक लंबवत गति से हटा दें। यदि ठीक से किया जाता है, तो यह तल पर ग्रीस का समान वितरण देगा सिलेंडर . ठीक सिलेंडर एक कॉलोनी के ऊपर।
आप स्थिर सेल लाइनों के लिए कॉलोनियों का चयन कैसे करते हैं?
स्थिर सेल लाइनों को उत्पन्न करने के लिए प्रोटोकॉल के लिए कई चरणों की आवश्यकता होती है जैसा कि नीचे दिखाया गया है:
- इष्टतम चयन एंटीबायोटिक एकाग्रता निर्धारित करने के लिए एक मार वक्र उत्पन्न करें।
- वांछित प्लाज्मिड निर्माण (ओं) के साथ ट्रांसफेक्ट कोशिकाएं
- स्थिर पॉलीक्लोनल कॉलोनियों का चयन करें और उनका विस्तार करें।
- सीमित कमजोर पड़ने और विस्तार द्वारा एकल क्लोन की पहचान करें।
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