वीडियो: डीडीएनटीपी का उपयोग करने का उद्देश्य क्या है?
2024 लेखक: Stanley Ellington | [email protected]. अंतिम बार संशोधित: 2023-12-16 00:17
डीडीएनटीपी को संदर्भित करता है डाइऑक्साइन्यूक्लियोटाइड्स ट्राइफॉस्फेट जो डीएनए अनुक्रमण के लिए डीएनए स्ट्रैंड की विभिन्न लंबाई का उत्पादन करने के लिए सेंगर डिडॉक्सी विधि में उपयोग किया जाता है। इसके परिणामस्वरूप डीएनए पोलीमराइजेशन (या डीएनए बढ़ाव) प्रक्रिया समाप्त हो जाती है क्योंकि इस प्रक्रिया को जारी रखने के लिए 3'-OH समूह की आवश्यकता होती है।
उसके बाद, अनुक्रमण में ddNTPs का उपयोग क्यों किया जाता है?
डाइऑक्साइन्यूक्लियोटाइड्स डीएनए पोलीमरेज़ के श्रृंखला-लम्बी अवरोधक हैं, उपयोग किया गया डीएनए के लिए सेंगर विधि में अनुक्रमण . डाइडॉक्सिराइबोन्यूक्लियोटाइड्स में 3' हाइड्रॉक्सिल समूह नहीं होता है, इसलिए एक बार यह डाइडॉक्सिन्यूक्लियोटाइड श्रृंखला पर होने के बाद कोई और श्रृंखला बढ़ाव नहीं हो सकती है। इससे डीएनए की समाप्ति हो सकती है अनुक्रम.
इसी तरह, क्या ddNTPs dNTPs से जुड़ते हैं? इनमें से एक या अधिक डीएनटीपी प्रतिकृति उत्पादों की कल्पना करने में मदद करने के लिए रेडियोधर्मी रूप से लेबल किए जाते हैं। अंत में, प्रत्येक ट्यूब को चार विशेष न्यूक्लियोटाइड्स में से एक मिलता है जिसे कहा जाता है डिडॉक्सिन्यूक्लियोटाइड्स ( डीडीएनटीपी ) हालांकि, एक बार शामिल होने के बाद, डीएनए पोलीमरेज़ श्रृंखला को आगे नहीं बढ़ा सकता है क्योंकि इसे 3'-OH to. की आवश्यकता होती है संलग्न करें अगले न्यूक्लियोटाइड के लिए।
इसी तरह कोई यह पूछ सकता है कि ddNTPs अनुक्रमण प्रतिक्रिया को कैसे रोकते हैं?
जब कम मात्रा में मौजूद हो अनुक्रमण प्रतिक्रियाएं , डिडिऑक्सीराइबोन्यूक्लियोसाइड ट्राइफॉस्फेट ( डीडीएनटीपी ) समाप्त करें अनुक्रमण प्रतिक्रिया बढ़ते डीएनए स्ट्रैंड में विभिन्न पदों पर। ddNTPs एक अनुक्रमण प्रतिक्रिया को रोकते हैं क्योंकि वे: डीएनए पोलीमरेज़ को टेम्प्लेट स्ट्रैंड से गिरने का कारण बनते हैं। सी।
डाइडॉक्सिन्यूक्लियोटाइड्स को शामिल करने वाली किस तकनीक का उपयोग किया जा सकता है?
सेंगर अनुक्रमण है a तरीका श्रृंखला-समापन के चयनात्मक समावेश के आधार पर डीएनए अनुक्रमण का डिडॉक्सिन्यूक्लियोटाइड्स इन विट्रो डीएनए प्रतिकृति के दौरान डीएनए पोलीमरेज़ द्वारा। 1977 में फ्रेडरिक सेंगर और उनके सहयोगियों द्वारा विकसित, यह सबसे व्यापक रूप से था उपयोग किया गया अनुक्रमण तरीका लगभग 40 वर्षों के लिए।
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