वीडियो: पीसीआर डिडॉक्सी डीएनए अनुक्रमण में कैसे भूमिका निभाता है?
2024 लेखक: Stanley Ellington | [email protected]. अंतिम बार संशोधित: 2023-12-16 00:17
पीसीआर कैसे खेलता है ए डिडॉक्सी डीएनए अनुक्रमण में भूमिका ? का उपयोग पीसीआर के पता लगाने योग्य स्तरों की अनुमति देता है डीएनए टेम्पलेट के बहुत निचले स्तरों से संश्लेषण डीएनए . क्यों है के दौरान एक डिडॉक्सिन्यूक्लियोटाइड का समावेश डीएनए श्रृंखला बनाना एक "प्रतिकृति-समाप्ति" घटना के रूप में पहचाना गया?
यह भी जानना है कि डीएनए अनुक्रमण की प्रक्रिया में पीसीआर का उपयोग क्यों किया जाता है?
पीसीआर के लिए खड़ा है पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन , और संक्षेप में, यह प्रतिलिपि बनाता है डीएनए लाखों बार बहुत जल्दी। यह है उपयोग किया गया में डीएनए श्रृंखला बनाना क्योंकि कभी कभी डीएनए नमूना बहुत छोटा है। ऐसा होता है, उदाहरण के लिए, अपराध स्थल के साक्ष्य में, या बहुत पुराने नमूनों में (जैसे। ममी)।
इसी तरह, डिडॉक्सी अनुक्रमण क्या है? डीएनए अनुक्रमण सटीक का निर्धारण है अनुक्रम डीएनए के एक नमूने में न्यूक्लियोटाइड की। ऐसा करने की सबसे लोकप्रिय विधि को कहा जाता है डिडॉक्सी विधि या सेंगर विधि (इसके आविष्कारक, फ्रेडरिक सेंगर के नाम पर रखा गया, जिन्हें इस उपलब्धि के लिए रसायन विज्ञान में [उनका दूसरा] नोबेल पुरस्कार से सम्मानित किया गया था)।
इस संबंध में, डीएनए अनुक्रमण में डाइडॉक्सिन्यूक्लियोटाइड की क्या भूमिका है?
डाइऑक्साइन्यूक्लियोटाइड्स के चेन-लम्बी अवरोधक हैं डीएनए पोलीमरेज़, में प्रयोग किया जाता है सेंगर के लिए विधि डीएनए श्रृंखला बनाना . डाइडॉक्सिराइबोन्यूक्लियोटाइड्स में 3' हाइड्रॉक्सिल समूह नहीं होता है, इसलिए एक बार इसके बाद कोई और श्रृंखला बढ़ाव नहीं हो सकती है। डिडॉक्सिन्यूक्लियोटाइड चेन पर है। यह की समाप्ति का कारण बन सकता है डीएनए अनुक्रम.
DNA अनुक्रमण में Ddntp का क्या कार्य है?
ए। वे के लिए प्राइमर के रूप में कार्य करते हैं डीएनए पोलीमरेज़
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सेंगर डीएनए अनुक्रमण कैसे काम करता है?
सेंगर अनुक्रमण के परिणामस्वरूप विभिन्न लंबाई के विस्तार उत्पादों का निर्माण होता है, जो 3' छोर पर डाइडॉक्सिन्यूक्लियोटाइड्स के साथ समाप्त होते हैं। विस्तार उत्पादों को तब केशिका वैद्युतकणसंचलन या सीई द्वारा अलग किया जाता है। अणुओं को एक विद्युत प्रवाह द्वारा एक जेल बहुलक से भरी एक लंबी कांच की केशिका में अंतःक्षिप्त किया जाता है
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अनुक्रमण से पहले पीसीआर उत्पादों को शुद्ध करना क्यों आवश्यक है?
वांछित उत्पाद का सत्यापन आवश्यक है, जिसमें गैर-विशिष्ट उत्पादों और प्राइमर डिमर की कमी की पुष्टि करना शामिल है। अनिगमित प्राइमरों और dNTPs को हटाने के लिए प्रतिक्रिया मिश्रण की सफाई भी आवश्यक है जो बाद की प्रतिक्रियाओं में हस्तक्षेप कर सकते हैं और एक अपठनीय अनुक्रम को जन्म दे सकते हैं