वीडियो: सेंगर डीएनए अनुक्रमण कैसे काम करता है?
2024 लेखक: Stanley Ellington | [email protected]. अंतिम बार संशोधित: 2023-12-16 00:17
सेंगर अनुक्रमण इसके परिणामस्वरूप विभिन्न लंबाई के विस्तार उत्पादों का निर्माण होता है, जो 3' छोर पर डाइडॉक्सिन्यूक्लियोटाइड्स के साथ समाप्त होते हैं। विस्तार उत्पादों को तब केशिका वैद्युतकणसंचलन या सीई द्वारा अलग किया जाता है। अणुओं को एक विद्युत प्रवाह द्वारा एक जेल बहुलक से भरी लंबी कांच की केशिका में अंतःक्षिप्त किया जाता है।
इस प्रकार डीएनए अनुक्रमण की सेंगर विधि क्या है?
सेंगर अनुक्रमण , जिसे श्रृंखला समाप्ति के रूप में भी जाना जाता है तरीका , के लिए एक तकनीक है डीएनए श्रृंखला बनाना द्वारा चेन-टर्मिनिंग डाइडॉक्सिन्यूक्लियोटाइड्स (ddNTPs) के चयनात्मक समावेश के आधार पर डीएनए इन विट्रो के दौरान पोलीमरेज़ डीएनए प्रतिकृति। फ्रेडरिक द्वारा विकसित किया गया था सेंगर और 1977 में सहकर्मी।
इसके अलावा, श्रृंखला समाप्ति अनुक्रमण कैसे काम करता है? सेंगर डीएनए अनुक्रमण के रूप में भी जाना जाता है जंजीर - समापन उसकि विधि अनुक्रमण . ddNTPs का परिणाम है समापन डीएनए स्ट्रैंड का क्योंकि ddNTPs में न्यूक्लियोटाइड्स के बीच फॉस्फोडाइस्टर बॉन्ड गठन के लिए आवश्यक 3'-OH समूह की कमी होती है। इस बंधन के बिना, जंजीर बनने वाले न्यूक्लियोटाइड का है समाप्त.
बस इतना ही, हम सेंगर अनुक्रमण क्यों करते हैं?
सेंगर अनुक्रमण है ए तरीका का डीएनए श्रृंखला बनाना द्वारा श्रृंखला-समापन डाइडॉक्सिन्यूक्लियोटाइड्स के चयनात्मक समावेश के आधार पर डीएनए इन विट्रो के दौरान पोलीमरेज़ डीएनए प्रतिकृति। शॉर्ट-रीड पर अभी भी इसका फायदा है अनुक्रमण प्रौद्योगिकियां (इलुमिना की तरह) कि यह कर सकते हैं उत्पाद डीएनए अनुक्रम > ५०० न्यूक्लियोटाइड पढ़ता है।
क्या सेंगर अनुक्रमण सटीक है?
सेंगर अनुक्रमण 99.99% के साथ शुद्धता नैदानिक अनुसंधान के लिए "स्वर्ण मानक" है अनुक्रमण . हालांकि, नई एनजीएस प्रौद्योगिकियां नैदानिक अनुसंधान प्रयोगशालाओं में भी आम होती जा रही हैं क्योंकि उनकी उच्च थ्रूपुट क्षमताओं और प्रति नमूना कम लागत है।
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हम सेंगर अनुक्रमण का उपयोग क्यों करते हैं?
नमूनों की कुल संख्या कम होने पर वैरिएंट स्क्रीनिंग अध्ययनों के लिए सेंगर अनुक्रमण एक प्रभावी तरीका है। वैरिएंट स्क्रीनिंग अध्ययनों के लिए जहां नमूना संख्या अधिक है, एनजीएस के साथ एम्प्लिकॉन अनुक्रमण अधिक कुशल और लागत प्रभावी है
सेंगर अनुक्रमण कितना सही है?
99.99% सटीकता के साथ सेंगर अनुक्रमण नैदानिक अनुसंधान अनुक्रमण के लिए "स्वर्ण मानक" है। हालांकि, नई एनजीएस प्रौद्योगिकियां नैदानिक अनुसंधान प्रयोगशालाओं में भी आम होती जा रही हैं क्योंकि उनकी उच्च थ्रूपुट क्षमताएं और प्रति नमूना कम लागत
सेंगर अनुक्रमण और अगली पीढ़ी के अनुक्रमण में क्या अंतर है?
अगली पीढ़ी की अनुक्रमण (एनजीएस) तकनीकें समान हैं। Sangersequencing और NGS के बीच महत्वपूर्ण अंतर अनुक्रमण मात्रा है। जबकि सेंगर विधि एक समय में केवल एक डीएनए टुकड़ा अनुक्रमित करती है, एनजीएस बड़े पैमाने पर समानांतर है, प्रति रन एक साथ लाखों टुकड़ों को अनुक्रमित करता है