वीडियो: जेल वैद्युतकणसंचलन करते समय प्रतिबंध एंजाइम का उपयोग कैसे किया जाता है?
2024 लेखक: Stanley Ellington | [email protected]. अंतिम बार संशोधित: 2023-12-16 00:17
1 उत्तर। डीएनए, आरएनए, या प्लास्मिड को काटने के लिए बंधन साइटों (जैसे EcoRI, BAMHI, hindIII और BglII) को छोटे आनुवंशिक टुकड़े बनाने के लिए जिन्हें अलग किया जा सकता है और इस प्रकार उपयोग करके विशेषता दी जा सकती है जेल वैद्युतकणसंचलन.
इसी तरह, कोई यह पूछ सकता है कि प्रतिबंध एंजाइमों की क्या भूमिका है?
ए प्रतिबंध वाले एंजाइम एक प्रोटीन है जो एक विशिष्ट, लघु न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम को पहचानता है और केवल उस विशिष्ट साइट पर डीएनए को काटता है, जिसे के रूप में जाना जाता है बंधन साइट या लक्ष्य अनुक्रम। जीवित जीवाणुओं में, प्रतिबंध एंजाइम कार्य वायरल बैक्टीरियोफेज पर हमला करने के खिलाफ सेल की रक्षा करने के लिए।
इसके अलावा, आप कैसे जानते हैं कि किस प्रतिबंध एंजाइम का उपयोग करना है? प्रतिबंध एंजाइमों का चयन करते समय, आप ऐसे एंजाइम चुनना चाहते हैं जो:
- अपने इंसर्ट को फ्लैंक करें, लेकिन अपने इंसर्ट के भीतर न काटें।
- आपके प्राप्तकर्ता प्लास्मिड (आमतौर पर मल्टीपल क्लोनिंग साइट (MCS) में) में वांछित स्थान पर हैं, लेकिन प्लास्मिड पर कहीं और न काटें।
इसके अलावा, शोध में प्रतिबंध एंजाइमों का उपयोग कैसे किया जाता है?
प्रयोगशाला में, प्रतिबंधित एंजाइम (या प्रतिबंध एंडोन्यूक्लाइजेस ) हैं उपयोग किया गया डीएनए को छोटे टुकड़ों में काटने के लिए। कटौती हमेशा विशिष्ट न्यूक्लियोटाइड अनुक्रमों में की जाती है। विभिन्न प्रतिबंधित एंजाइम विभिन्न डीएनए अनुक्रमों को पहचानें और काटें।
जेल वैद्युतकणसंचलन की भूमिका क्या है?
जेल वैद्युतकणसंचलन डीएनए के टुकड़ों को उनके आकार के अनुसार अलग करने के लिए इस्तेमाल की जाने वाली तकनीक है। डीएनए नमूने a. के एक छोर पर कुओं (इंडेंटेशन) में लोड किए जाते हैं जेल , और उन्हें के माध्यम से खींचने के लिए एक विद्युत प्रवाह लागू किया जाता है जेल . डीएनए के टुकड़े नकारात्मक रूप से चार्ज होते हैं, इसलिए वे सकारात्मक इलेक्ट्रोड की ओर बढ़ते हैं।
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प्रकृति में उपयोग किए जाने वाले प्रतिबंध एंजाइम क्या हैं?
प्रतिबंध एंजाइम, जिसे प्रतिबंध एंडोन्यूक्लिज़ भी कहा जाता है, बैक्टीरिया द्वारा उत्पादित प्रोटीन जो अणु के साथ विशिष्ट साइटों पर डीएनए को साफ करता है। जीवाणु कोशिका में, प्रतिबंध एंजाइम विदेशी डीएनए को साफ करते हैं, इस प्रकार संक्रमित जीवों को नष्ट कर देते हैं
प्रतिबंध एंजाइम कैसे डीएनए में हेरफेर करते हैं?
बैक्टीरियोफेज, या फेज नामक जीवाणु वायरस से बचाव के लिए एक जीवाणु एक प्रतिबंध एंजाइम का उपयोग करता है। जब एक फेज एक जीवाणु को संक्रमित करता है, तो यह अपने डीएनए को जीवाणु कोशिका में सम्मिलित करता है ताकि इसे दोहराया जा सके। प्रतिबंध एंजाइम फेज डीएनए को कई टुकड़ों में काटकर उसकी प्रतिकृति को रोकता है
किस प्रकार का एंजाइम रेट्रोवायरस से अलग किया जाता है और सीडीएनए का उत्पादन करने के लिए प्रयोग किया जाता है?
रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस, जिसे आरएनए-निर्देशित डीएनए पोलीमरेज़ भी कहा जाता है, रेट्रोवायरस की आनुवंशिक सामग्री से एन्कोड किया गया एक एंजाइम है जो डीएनए (डीऑक्सीराइबोन्यूक्लिक एसिड) में रेट्रोवायरस आरएनए (राइबोन्यूक्लिक एसिड) के प्रतिलेखन को उत्प्रेरित करता है।
जैव प्रौद्योगिकी में प्रतिबंध एंजाइम और लिगेज का उपयोग कैसे किया जाता है?
प्रतिबंध एंजाइम डीएनए काटने वाले एंजाइम हैं। डीएनए लिगेज डीएनए से जुड़ने वाला एंजाइम है। यदि डीएनए के दो टुकड़ों में मेल खाने वाले सिरे हैं, तो लिगेज उन्हें डीएनए के एकल, अखंड अणु बनाने के लिए जोड़ सकता है। डीएनए क्लोनिंग में, प्लास्मिड में जीन और डीएनए के अन्य टुकड़ों को सम्मिलित करने के लिए प्रतिबंध एंजाइम और डीएनए लिगेज का उपयोग किया जाता है