क्या आप पीसीआर उत्पाद को अनुक्रमित कर सकते हैं?
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Anonim

सीधे अनुक्रमण का पीसीआर उत्पाद . सीधे तौर पर संभव है अनुक्रम ए पीसीआर उत्पाद पहले टुकड़े को क्लोन किए बिना। सीधे पीसीआर अनुक्रमण शायद ही कभी सफल होता है जब तक आप यह सुनिश्चित करने में कुछ समय व्यतीत करें आप में नहीं पड़ रहे हैं एक कई जालों में से।

इस तरह से पीसीआर सीक्वेंसिंग क्या है?

सीधे अनुक्रमण का पीसीआर उत्पाद। आपको सभी को हटाना होगा पीसीआर उत्पाद से पहले प्राइमर और अनिगमित न्यूक्लियोटाइड हैं अनुक्रम . अनुक्रमण में उपयोग किए गए दो के बजाय केवल एक प्राइमर का उपयोग करता है पीसीआर . यदि आप दोनों प्राइमरों को नहीं हटाते हैं, तो आपको दो मिलेंगे दृश्यों एक दूसरे पर आरोपित जो पठनीय नहीं हैं।

इसी तरह, क्या मैं अनुक्रमण के लिए पीसीआर प्राइमरों का उपयोग कर सकता हूं? पीसीआर प्राइमर के लिए अभिप्रेत हैं पीसीआर एक एम्प्लिकॉन प्राप्त करने के लिए प्रवर्धन। अनुक्रमण प्राइमर हैं उपयोग किया गया प्रति अनुक्रम एक डीएनए टुकड़ा और उसके डीएनए को प्रकट करता है अनुक्रम पहचान लो। 4. दो पीसीआर प्राइमर a. में आवश्यक हैं पीसीआर प्रतिक्रिया (आमतौर पर); केवल एक अनुक्रमण प्राइमर a. में जोड़ा जाता है अनुक्रमण प्रतिक्रिया।

इसे ध्यान में रखते हुए, आप पीसीआर उत्पादों का परीक्षण कैसे करते हैं?

का पता लगाना और विश्लेषण करना पीसीआर उत्पाद . NS उत्पाद का पीसीआर परिभाषित लंबाई के डीएनए का एक टुकड़ा या टुकड़ा होना चाहिए। प्रवर्धित अनुक्रमों का पता लगाने के लिए कई तकनीकों का उपयोग किया जा सकता है (तालिका देखें)। सबसे सरल और आमतौर पर इस्तेमाल की जाने वाली तकनीक वैद्युतकणसंचलन है पीसीआर उत्पाद EtBr (एथिडियम ब्रोमाइड) के साथ एक agarose जेल पर।

अनुक्रमण से पहले पीसीआर उत्पादों को शुद्ध करना क्यों आवश्यक है?

शुद्धिकरण a. से DNA का पीसीआर प्रतिक्रिया आम तौर पर होती है के लिए आवश्यक डाउनस्ट्रीम उपयोग, और एंजाइम, न्यूक्लियोटाइड, प्राइमर और बफर घटकों को हटाने की सुविधा प्रदान करता है।

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