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आप प्लास्मिड में जीन कैसे डालते हैं?
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वीडियो: आप प्लास्मिड में जीन कैसे डालते हैं?

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वीडियो: Simply Cloning - Chapter 1 - Planning 2024, नवंबर
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बुनियादी कदम हैं:

  1. कट ओपन प्लाज्मिड और "पेस्ट" में जीन . यह प्रक्रिया प्रतिबंध एंजाइमों (जो डीएनए को काटती है) और डीएनए लिगेज (जो डीएनए से जुड़ती है) पर निर्भर करती है।
  2. डालने NS में प्लाज्मिड बैक्टीरिया।
  3. खूब बढ़ो प्लाज्मिड -बैक्टीरिया को ले जाना और प्रोटीन बनाने के लिए "कारखानों" के रूप में उनका उपयोग करना।

इसके अलावा, एक प्लाज्मिड GCSE में एक जीन कैसे डाला जा सकता है?

यह है एक प्लास्मिड में डाला गया लिगेज एंजाइम का उपयोग करना। NS प्लाज्मिड जाता है में एक जीवाणु कोशिका। ट्रांसजेनिक जीवाणु प्रजनन करता है, जिसके परिणामस्वरूप में लाखों समान बैक्टीरिया जो मानव इंसुलिन का उत्पादन करते हैं।

इसके अतिरिक्त, आप एक जीन को उपक्लोन कैसे करते हैं? के लिए बुनियादी कदम सबक्लोनिंग आप पैरेंट वेक्टर से अपने इंसर्ट को छोड़ते हैं और शुद्ध करते हैं, इस इंसर्ट को तैयार डेस्टिनेशन वेक्टर में लिगेट करते हैं, इस लिगेशन रिएक्शन को सक्षम बैक्टीरिया कोशिकाओं में बदलते हैं। फिर आप सम्मिलित करने के लिए रूपांतरित कक्षों को स्क्रीन करते हैं।

इसे ध्यान में रखते हुए, जीन क्लोनिंग के 4 चरण क्या हैं?

शास्त्रीय प्रतिबंध एंजाइम पाचन और बंधन क्लोनिंग प्रोटोकॉल में, किसी भी डीएनए टुकड़े के क्लोनिंग में अनिवार्य रूप से चार चरण शामिल होते हैं:

  • ब्याज के डीएनए का अलगाव (या लक्ष्य डीएनए),
  • बंधन,
  • अभिकर्मक (या परिवर्तन), और।
  • एक स्क्रीनिंग / चयन प्रक्रिया।

आप एक प्लास्मिड को कैसे बढ़ाते हैं?

प्रायोगिग विधि

  1. पीसीआर चलाएं और पीसीआर उत्पाद को शुद्ध करें: अपने सम्मिलित डीएनए को बढ़ाने के लिए पीसीआर चलाएं।
  2. अपने डीएनए को डाइजेस्ट करें:
  3. जेल शुद्धिकरण द्वारा अपने डालने और वेक्टर को अलग करें:
  4. अपने वेक्टर में अपनी प्रविष्टि को बांधें:
  5. परिवर्तन:
  6. तैयार प्लास्मिड को अलग करें:
  7. अनुक्रमण द्वारा अपने प्लास्मिड को सत्यापित करें:

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